Peptidase
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Peptidase

Peptidase hydrolysiert Caseinsubstrate bei 40 ° C und pH 6,0 unter Bildung von Aminosäuren, die phenolische Gruppen enthalten.

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Erzeugnis Schilderung

Tube number Concentration of tyrosine standard solution(ug/mL) 100ug/mL Volume of tyrosine standard solution (mL) Volume of water taken( mL)
0 0 0 0
1 10 1 9
2 20 2 8
3 30 3 7
4 40 4 6
5 50 5 5


b. Take 1.00mL of each of the above personnel (parallel test is required), add 5.00mL of 0.4mol / L sodium carbonate solution, 1.00mL of Folin reagent use solution, place in a 40 ± 0.2 ℃ water bath for 20min, and take it out. Use a spectrophotometer at a wavelength of 680nm and 10mm cuvette. Take the "0" tube containing no tyrosine as blanks, and measure the absorbance respectively. Take the absorbance A as the ordinate and the tyrosine concentration c as the abscissa. , Draw a standard curve (this curve should pass the zero point).

According to the plot or the regression equation, the amount of tyrosine (ug) when the absorbance is 1 is calculated, which is the absorbance constant K value. Its K value should be in the range of 95-100.


2 Determination
(1) Preparation of Peptidase
a. Weigh 1~2g of enzyme powder, accurate to 0.0002g (or absorb 1.00mL of liquid enzyme), dissolve with a small amount of pH6.0 buffer solution, and grind it with a glass rod, then carefully pour the supernatant into a volumetric flask. Add a small amount of the above-mentioned buffer solution to the sediment to dissolve it, and grind it for 3 to 4 times, and finally transfer it all into a volumetric flask, make up to volume with the buffer solution, and shake well. Filter through four layers of gauze, and the filtrate is once again diluted to the appropriate concentration with a buffer according to the enzyme activity for measurement (diluted to the measured absorbance within the range of 0.25 to 0.40).
b. For the determination of enzyme powder, refer to Table A4 for the dilution factor (liquid enzyme can also refer to Table A4 for dilution).

Enzyme activity unit Total multiples First dilution Second dilution
20000 2000 2g→200ml(100 times) 5ml→100ml(20 times)
30000 2500 2g→500ml(250 times) 5ml→50ml(10 times)
40000 4000 2g→200ml(100 times) 5ml→200ml(40 times
50000 5000 2g→500ml(250 times) 5ml→100ml(20 times)
80000~100000 10000 2g→500ml(250 times) 5ml→200ml(40 times


(2) Measurement

a. First put the casein solution into a 40 ± 0.2 ℃ constant temperature water bath and preheat for 5min.
b. Follow the procedure below:
Test tube A (blank)
→ Add 1.00mL of enzyme solution (40 ± 0.2 ℃)
→ Add 2.00mL of trichloroacetic acid (shake well) (40 ± 0.2 ℃)
→ Add casein 1.00mL (shake well)
→ Take it out for 10 minutes and filter
→ take 1.00mL filtrate
→ Add sodium carbonate solution 5.00mL
→ 1.00 mL of Jiafulin reagent solution (40 ± 0.2 ℃, color development 20min)
→ At a wavelength of 680nm, measure its absorbance with a 10mm cuvette

Test tube B (enzyme sample, three parallel samples are required)
→ Add 1.00mL of enzyme solution (40 ± 0.2 ℃)
→ Add casein 1.00mL (shake well, react at 40 ± 0.2 ℃ for 10min)
→ Add 2.00mL of trichloroacetic acid (shake well)
→ Take it out for 10 minutes and filter
→ take 1.00mL filtrate
→ Add sodium carbonate solution 5.00mL
→ 1.00 mL of Jiafulin reagent solution (40 ± 0.2 ℃, color development 20min)
→ At a wavelength of 680nm, measure its absorbance with a 10mm cuvette

Calculation
X = A × K × 4/10 × n = 2/5 × A × K × n
In the formula:
X ---- enzyme activity of the sample, u / g (u / mL);
A ---- The average absorbance of the sample in parallel test;
K ---- absorption constant;
4 ---- the total volume of the reaction;
10 --- reaction time 10min, calculated as 1min;
n ---- Dilution multiple.

The result obtained is expressed as an integer.

The allowable difference between the results of parallel tests shall not exceed 3%.


CERTIFICATE OF ANALYSIS 



Definition von Peptidase

1 g Enzympulver (oder 1 ml flüssiges Enzym) hydrolysiert bei 40 ° C, pH 6,0, 1 min Casein, um 1 ug Tyrosin als Enzymaktivitätseinheit in U / g (U / ml) herzustellen.

Forint-Methode


Prinzip vonPeptidase
Peptidase hydrolysiert Caseinsubstrate bei 40 ° C und pH 6,0, um Aminosäuren mit phenolischen Gruppen herzustellen. Unter alkalischen Bedingungen wird das Folinreagenz unter Bildung von Molybdänblau und Wolframblau reduziert. Mit Spektrophotometer messen und berechnen. Seine Enzymaktivität.

Reagenzien und Lösungen
1 Herstellung von Peptidase
In einer 2000-ml-Mühlenmund-Reflow-Vorrichtung werden 100 g Natriumwolframat (Na2WO4 · 2H2O), 25 g Natriummolybdat (Na2MOO4 · 2H2O), 700 ml Wasser, 50 ml 85% ige Phosphorsäure, 100 ml zugegeben konzentrierte Salzsäure, 10 h bei schwacher Hitze kochen, Rückflusskühler entfernen In einem Abzug 50 g Lithiumsulfat (LiSO4), 50 ml Wasser und einige Tropfen konzentriertes Bromwasser (99%) hinzufügen und 15 Minuten kochen lassen, um überschüssiges Brom zu entfernen (nach dem Abkühlen grünes Bromwasser hinzufügen und leicht kochen. Überschüssiges Brom entfernen), abkühlen lassen, Wasser auf 1000 ml auffüllen, gut mischen und filtrieren. Die Reagenzien sollten goldgelb sein und in braunen Flaschen aufbewahrt werden.
Lösung verwenden: Einen Teil des Fulin-Reagens mit zwei Teilen Wasser mischen und gut schütteln.
2 Natriumcarbonatlösung c (Na 2 CO 3) = 0,4 mol / l
Nehmen Sie 42,4 g wasserfreies Natriumcarbonat, lösen Sie es in Wasser und füllen Sie es auf 1000 ml auf.
3 Trichloressigsäure c (CCL 3 · COOH) = 0,4 mol / l
Nehmen Sie 65,4 g Trichloressigsäure, lösen Sie sie in Wasser und füllen Sie sie auf 1000 ml auf.
4 Natriumhydroxidlösung c = 0,5 mol / l
Vorbereitet nach GB 601.
5 Salzsäurelösung c = 1 mol / l und 0,1 mil / l
GB 601: 90 ml Salzsäure messen, in 1000 ml Wasser gießen und schütteln, um 1 mol / l Salzsäure zu erhalten.
9 ml Salzsäure abmessen, in 1000 ml Wasser gießen und schütteln, um 0,1 mol / l Salzsäure zu erhalten.
6 Pufferlösung
Phosphatpuffer (pH = 6,0) für Aromaproteasen
45,23 g Dinatriumhydrogenphosphat (Na2HPO4 · 12H2O) und 8,07 g Zitronensäure (C6H6O7 · H2O) werden gewogen, in Wasser gelöst und auf 1000 ml aufgefüllt. Verwenden Sie nach der Zubereitung ein pH-Messgerät, um dies zu korrigieren.
7 10 g / l Casein (Casein) -Lösung
1.000 g Kasein mit einer Genauigkeit von 0,001 g werden gewogen, mit einer kleinen Menge 0,5 mol / l Natriumhydroxidlösung angefeuchtet, etwa 80 ml Puffer mit einem pH-Wert von 6,0 zugegeben und unter Erhitzen in einem kochenden Wasserbad gerührt, bis es vollständig aufgelöst ist. In einen 100-ml-Messkolben überführen und mit einem Puffer mit einem pH-Wert von 6,0 bis zur Marke verdünnen. Diese Lösung wird 3 Tage im Kühlschrank aufbewahrt.
8 100ug / mlL-Tyrosin-Standardlösung
ein. 0,1000 g L-Tyrosin werden gewogen, bei 105ºC bis zur Gewichtskonstanz getrocknet, auf 0,0002 g genau, und mit 60 ml 1 mol / l Salzsäure gelöst, um bis zu 100 ml zu ergeben.
b. Pipettieren Sie 10,00 ml einer 1 mg / ml Tyrosin-Standardlösung und füllen Sie mit 0,1 mol / l Salzsäure auf 100 ml auf, um eine 100 ug / ml l Tyrosin-Standardlösung zu erhalten.

Instrumente und Ausrüstung der Peptidase
1 Wasserbad mit konstanter Temperatur: 40 ± 0,2 ƒ
2 Spektralphotometer: sollte den Anforderungen von GB 9721 entsprechen

Analyseschritte der Peptidase
1 Zeichnung der Standardkurve
ein. L-Tyrosin-Standardlösung. Hergestellt gemäß Tabelle A3

Tabelle A3


Produktname Peptidase    
Anderer Name N / A Herkunftsland China
Belastung Aspergillus oryzae Herstellungsdatum 16. Juli 2018
Chargennummer PE18071601 Haltbarkeitsdatum 15. Juli 2020
Paket 25 kg / Eimer Menge 100 kg
PROTOKOLL SPEZIFIKATIONEN ERGEBNISSE METHODE
PHYSIKALISCHE & CHEMISCHE ANALYSE
Beschreibung Braunes Pulver Entspricht Visuell
Geruch & Geschmack Charakteristischer Geruch und Geschmack Entspricht Geschmack
Feuchtigkeit NMT 7% 3,9% Feuchtigkeitsanalysator
IDENTIFIZIERUNG
Identifizierbare Aktivität Positiv für die Serratiopeptidase-Aktivität Entspricht Im Haus
AKTIVITÄT
Katalaseaktivität NLT 20.000 IE / g 200.210 U / g Im Haus
MIKROBIOLOGISCH
Gesamtzahl der Bakterien
Coliforme Bakterien (KBE / g)
Schimmelpilze und Hefen
E coli
Salmonellen
Staphylococcus aureus
Pseudomonas aeruginosa
NMT 3.000 KBE / g
NMT 30 KBE / g
NMT 100 KBE / g
Abwesend
Abwesend
Abwesend
Abwesend
Entspricht
Entspricht
Entspricht
Entspricht
Entspricht
Entspricht
Entspricht
FDA BAM Online Ch.3
FDA BAM Online Ch.4
FDA BAM Online Kap. 2
FDA BAM Online Ch.4
FDA BAM Online Ch.5
FDA BAM Online Ch.12
AOAC
SCHWERMETALLE
Führen
Merkur
Cadmium
Arsen
NMT 3 ppm
NMT 0,1 ppm
NMT 1 ppm
NMT 1 ppm
Entspricht
Entspricht
Entspricht
Entspricht
USP <231>
USP <231>
USP <231>
USP <231>
Lagerung: An einem kühlen und trockenen Ort vor Licht geschützt lagern, Trommel bei Nichtgebrauch in der Nähe halten.
Haltbarkeit: Die Haltbarkeit unter vorgeschriebenen Lagerbedingungen und luftdichter Verpackung beträgt 2 Jahre.
Das Produkt entspricht den oben genannten Spezifikationen
Genehmigt von RICKY H. ZHU Zeichnungsberechtigter

Verpackung und Lagerung

Verpackungsbeutel für feste Lebensmittel, 25 kg / Barrel.


Peptidase sollte s seinan trockenen, kühlen und gut belüfteten Orten fern von der Sonne, Hitze.

Zahlung :T / T, Paypal, Western Union, Alibaba Trade Assurance, VISA, MasterCard, E-Checking, späteres Bezahlen, LC usw.

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